УТВЕРЖДЕНЫ
Постоянным комитетом
по контролю наркотиков
7 февраля 1996 г.,
протокол N 45/1-96
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЭКСПЕРТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МДА, МДМА, МДЕА, МБДБ <*>
--------------------------------
<*> Разработчики В.И.Сорокин, О.С.Щерба, М.А.Дроздов и др.,
ЭКЦ МВД РФ.
Наркотические средства МДА (3,4-метилендиоксиамфетамин), МДМА
(3,4-метилендиоксиметамфетамин), МДЕА (N-этил МДА,
3,4-метилендиоксиэтиламфетамин) и МБДБ
(N-метил-1-(3,4-метилендиоксифенил)-2-бутанамин) являются наиболее
распространенными на нелегальном рынке торговли наркотиками
производными амфетамина. Эти наркотики встречаются в незаконном
обороте в виде порошков, капсул, но чаще всего в виде таблеток. На
таблетках, содержащих МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ, как правило, имеются
различные изображения: корона, птичка, автомобили, голова индейца,
гнома, символическое изображение доллара, могут встречаться
различные надписи (ADAM, EVE, LOVE) и т.д. Принимают препараты
обычно перорально, редко - введением внутривенно.
Для выявления МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ можно пользоваться
методами капельного химического анализа, тонкослойной, газовой и
жидкостной хроматографии, ИК-спектроскопии и хроматомасс -
спектрометрии.
КАПЕЛЬНЫЙ ХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ
При проведении капельного химического анализа применяют
реактив Марки. Навеску вещества массой 5 - 10 мг растирают в
ступке, растертый порошок помещают в фарфоровую чашку и добавляют
2 - 3 капли реактива Марки, наблюдая при этом за появившейся
окраской. В случае наличия в исследуемом объекте какого-либо из
четырех рассматриваемых веществ появляется сине - черное
окрашивание, постепенно переходящее в зелено - черное.
ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
Исследование МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ методом тонкослойной
хроматографии проводят в системах растворителей:
хлороформ - ацетон - этанол-25% водный раствор аммиака 20:20:3:1
(система N 1), толуол - этанол - триэтиламин 9:1:1 (система N 2).
Навеску вещества массой 5 - 10 мг растирают в ступке,
добавляют 0,5 мл хлороформа, нагревают до начала кипения и после
охлаждения наносят на хроматографическую пластину 4 - 5 мкл
полученного экстракта. После окончания хроматографирования
пластину сушат при 50 град. С в течение 10 мин, а затем выявляют
хроматографические зоны.
Хроматографические зоны выявляют по гашению флуоресценции при
254 нм, проявлением реактивом Марки или раствором нингидрина в
ацетоне (0,5 г нингидрина в 40 мл ацетона). При проявлении
раствором нингидрина пластину после опрыскивания нагревают до 70
град. С и выдерживают при этой температуре 5 - 8 мин. Значения Rf
на пластинах SORBFIL ПТСХ П-В-УФ и Merck Kieselgel 60 F 254
указаны в табл. 1 и 2. Для сравнения в таблицах даны значения Rf
для метамфетамина.
ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
Газохроматографический анализ проводят при следующих условиях:
колонка кварцевая капиллярная длиной 12 - 20 м и диаметром 0,2 мм
со стационарной фазой OV-101. Температура испарителя 220 град. С,
детектора 290 град. С. Температура колонки меняется от 100 град. С
до 280 град. С со скоростью 10 град. С/мин. Газ - носитель - гелий
(азот), детектор пламенно - ионизационный. Индекс удерживания в
этих условиях для МДА - 1465, МДМА - 1515, МДЕА - 1566, МБДБ -
1610.
Если амфетамины хроматографируются в виде несимметричных
пиков, необходимо исследовать их в виде ацетильных производных.
Для этого навеску вещества массой примерно 1 мг (берется точная
навеска) заливают 1 мл хлороформа, добавляют 1 каплю 1 N водного
раствора щелочи и полученную смесь встряхивают. После отстаивания
раствора отбирают хлороформ, добавляют к нему 0,1 мл уксусного
ангидрида и выдерживают смесь в течение 20 мин. при 60 град. С.
Полученные растворы после охлаждения хроматографируют в указанных
выше условиях. Температура испарителя в этом случае равна 275
град. С. Индексы удерживания ацетильных производных МДА - 1816,
МДМА - 1905, МДЕА - 1951, МБДБ - 1969.
Таблица 1
Значения Rf амфетаминов в системе
хлороформ - ацетон - этанол - 25%
водный раствор аммиака 20:20:3:1
---T--------T----------T----------T-------------------------------
| N|Вещество| Пластины | Пластины |Окраска хроматографических зон|
|п/| | Merck | Сорбфил | |
|п | | | | |
| | +----T-----+----T-----+-----------------T------------+
| | | Rf | Rs | Rf | Rs | Реактив Марки | Нингидрин |
+--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+------------+
|1 |МДА |0,44|1,76 |0,66|1,73 |Сине - зеленый ->|Желтый |
| | | | | | |зелено - черный | |
+--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+------------+
|2 |МДМА |0,12|0,48 |0,23|0,60 |Сине - зеленый ->|Фиолетово - |
| | | | | | |зелено - черный |коричневый |
+--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+------------+
|3 |МДЕА |0,27|1,08 |0,46|1,20 |Сине - зеленый ->|Нет |
| | | | | | |зелено - черный | |
+--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+------------+
|4 |МБДБ |0,26|1,04 |0,41|1,08 |Сине - зеленый ->|Фиолетово - |
| | | | | | |зелено - черный |коричневый |
+--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+------------+
|5 |Метам- |0,25|1,0 |0,38|1,0 |Коричневый |Фиолетовый |
| |фетамин | | | | | | |
L--+--------+----+-----+----+-----+-----------------+-------------
Таблица 2
Значения Rf амфетаминов в системе
толуол - этанол - триэтиламин (диэтиламин) 9:1:1
---T--------T------------T------------T--------------------------
| N|Вещество| Пластины | Пластины | Окраска |
|п/| | Merck | Сорбфил | хроматографических зон |
|п | | | | |
| | +------T-----+------T-----+-------------------------+
| | | Rf | Rs | Rf | Rs |Реактив Марки |
+--+--------+------+-----+------+-----+-------------------------+
|1 |МДА | 0,31 |0,86 |0,46 |1,0 |Сине - зеленый ->|
| | | | | | |зелено - черный |
+--+--------+------+-----+------+-----+-------------------------+
|2 |МДМА | 0,36 |1,0 |0,46 |1,0 |Сине - зеленый ->|
| | | | | | |зелено - черный |
+--+--------+------+-----+------+-----+-------------------------+
|3 |МДЕА | 0,56 |1,56 |0,64 |1,40 |Сине - зеленый ->|
| | | | | | |зелено - черный |
+--+--------+------+-----+------+-----+-------------------------+
|4 |МБДБ | 0,54 |1,50 |0,62 |1,35 |Сине - зеленый ->|
| | | | | | |зелено - черный |
+--+--------+------+-----+------+-----+-------------------------+
|5 |Метамф- | 0,36 |1,0 |0,46 |1,0 |Коричневый |
| |фетамин | | | | | |
L--+--------+------+-----+------+-----+--------------------------
ХРОМАТОМАСС - СПЕКТРОМЕТРИЯ
Исследование амфетаминов методом хроматомасс - спектрометрии
проводят с ионизацией электронным ударом и предварительным
разделением компонентов на кварцевой капиллярной колонке длиной
12-25 м и диаметром 0,2 мм с диметилсиликоновой стационарной фазой
в описанных выше условиях. Температура интерфейса детектора
составляет 250 град. С. Масс - спектр МБДБ находится в библиотеке
Pfleger/Maurer/Weber MS Drugs Library, а спектры МДА, МДМА и МДЕА
- в библиотеке Nist MS ChemSt Library of 74828 Spectra (США).
ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
Анализ МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ методом высокоэффективной
жидкостной хроматографии проводят на жидкостном хроматографе
"Милихром-4".
Условия анализа: колонка типа КАХ-4 размером 80 х 2 мм с
обращенно - фазным сорбентом "Separon С 18" (НПО "Научприбор",
г. Орел); подвижная фаза - фосфатный буфер: ацетонитрил (80:20);
изократическое элюирование со скоростью 120 мкл/мин;
спектрофотометрический детектор, работающий в режиме
одновременного пятиволнового детектирования на длинах волн 210,
220, 230, 250, 280 нм; объем вводимой пробы - 10 мкл; максимальная
длительность проведения анализа - 20 мин.
Для приготовления фосфатного буфера растворяют в 1 л
дистиллированной воды 3,0 г КОН, 12,0 г 82% орто - фосфорной
кислоты и 3,0 г диэтиламина (или гексиламина). Буфер указанного
состава должен иметь значение рН, равное 3. В случае отклонения рН
буфера от указанной величины, следует провести корректировку,
добавляя водный раствор щелочи или кислоту. Значение рН буфера
предварительно определяют по универсальной индикаторной бумаге.
Для более точного определения следует использовать рН-метр любого
типа.
Подвижную фазу готовят, смешивая фосфатный буфер с
ацетонитрилом в указанном соотношении, и тщательно перемешивают с
помощью магнитной мешалки. Подвижную фазу фильтруют и дегазируют,
помещая в ультразвуковую баню на 20 мин. или продувая гелием в
течение 20 мин. (дегазация гелием более эффективна).
Для определения хроматографических параметров разделения
производных амфетамина готовят тестовую модельную смесь
индивидуальных веществ. Для этого навески индивидуальных веществ
помещают в мерную колбу и растворяют в подвижной фазе с таким
расчетом, чтобы концентрация каждого компонента в растворе не
превышала 0,1 мг/мл. Раствор тщательно перемешивают в
ультразвуковой бане, фильтруют, дегазируют, продувая гелием в
течение 20 мин., и хроматографируют в указанных условиях.
Хроматограмма модельной смеси МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ представлена
на рис. 1.
Рис. 1 Хроматограмма модельной смеси МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ в
режиме пятиволнового детектирования хроматографа "Мелихром-4" <*>
--------------------------------
<*> Рисунок не приводится.
Идентификацию компонентов на хроматограмме модельной смеси
проводят путем сопоставления времени их удерживания и
коэффициентов емкости с временем удерживания и коэффициентами
емкости индивидуальных веществ, путем сравнения их УФ-спектров с
УФ-спектрами индивидуальных веществ, а также методом добавок
индивидуальных веществ в анализируемую смесь.
Хроматографические параметры разделения МДА, МДМА, МДЕА и МБДБ
для указанных условий приведены в табл. 3.
Таблица 3
Хроматографические параметры разделения
производных амфетамина
--------------T-----------------T-----------------T---------------
|Анализируемый| Абсолютное время| Исправленное | Коэффициент |
| амфетамин |удерживания, мин.| время | емкости (k1) |
| | (tr) |удерживания, мин.| |
| | | (tro) | |
+-------------+-----------------+-----------------+--------------+
|МДА | 3,90 | 2,20 | 1,29 |
+-------------+-----------------+-----------------+--------------+
|МДМА | 4,10 | 2,40 | 1,41 |
+-------------+-----------------+-----------------+--------------+
|МДЕА | 5,40 | 3,70 | 2,18 |
+-------------+-----------------+-----------------+--------------+
|МБДБ | 6,04 | 4,34 | 2,55 |
L-------------+-----------------+-----------------+---------------
На рис. 2 представлена хроматограмма и УФ-спектр МДА,
полученные в режиме пятиволнового детектирования спектрофотометра
хроматографа "Милихром-4". МДМА, МДЕА и МБДБ имеют УФ-спектры,
аналогичные МДА.
Рис. 2. Хроматограмма и УФ-спектр МДА (УФ-детектор
"Милихром-4") <*>
--------------------------------
<*> Рисунок не приводится.
Все представленные хроматограммы и УФ-спектры получены с
помощью программно - аппаратурного комплекса МультиХром - Спектр,
разработанного АО АМПЕРСЕНД (г. Москва). При отсутствии данного
комплекса снятие УФ-спектров компонентов хроматограмм проводят в
процессе анализа в автоматическом режиме работы хроматографа
"Милихром-4" при внесении соответствующих изменений в программу
работы спектрофотометрического детектора.
Для проведения количественных определений производных
амфетамина калибруют УФ-детектор, применяя для этого растворы
индивидуальных веществ с точно известной концентрацией (метод
абсолютной калибровки). Для приготовления калибровочных растворов
точные навески индивидуальных веществ растворяют в рассчетном
объеме подвижной фазы для получения растворов с концентрацией
точно 1,0 мг/мл. Далее растворы последовательно разбавляют
подвижной фазой для получения растворов с концентрациями 0,5;
0,25; 0,125; 0,0625; 0,0312 и 0,0156 мг/мл. Приготовленные
растворы хроматографируют при неизменных условиях. По результатам
анализа строят калибровочные графики. Для всех исследованных
веществ получена линейная зависимость, описываемая уравнением
первого порядка: Y = k х X, которая соблюдается при детектировании
сигнала на длине волны 210 нм, в диапазоне концентраций от 0,0156
мг/мл до 1,0 мг/мл.
Если для приготовления калибровочных растворов используют
производные амфетамина в форме хлористоводородных или других
солей, в расчеты необходимо внести поправочный коэффициент,
позволяющий определить концентрацию вещества в пересчете на
основание. Количественное содержание производных амфетамина в
криминальных образцах также всегда следует указывать в пересчете
на вещество в форме основания.
Анализ образцов, изъятых из незаконного оборота и содержащих
производные амфетамина, проводят следующим образом. Точную навеску
анализируемого вещества экстрагируют в точно измеренном объеме
подвижной фазы. При этом концентрация анализируемого вещества в
растворе не должна превышать 1,0 мг/мл. Экстракцию проводят при
нормальной температуре в ультразвуковой бане в течение 20 мин.
Полученный экстракт фильтруют, дегазируют путем продувки гелием и
хроматографируют в указанных условиях. Выявление
хроматографических пиков, соответствующих производным амфетамина,
проводят, сравнивая время удерживания компонентов хроматограммы
экстракта с временем удерживания компонентов хроматограммы
модельной смеси и УФ-спектров компонентов хроматограммы экстракта
с УФ-спектрами индивидуальных веществ, а также методом добавок.
Концентрацию производных амфетамина в экстракте анализируемого
вещества определяют по калибровочным графикам. Содержание
производных амфетамина в анализируемом веществе - Х(%)
рассчитывают по формуле:
Х = (C х V / m) x 100,
где С - концентрация производного амфетамина в экстракте,
мг/мл, найденная по калибровочному графику;
V - точный объем экстрагента, мл;
m - точная навеска анализируемого вещества, подвергнутая
экстракции, мг.
Предел обнаружения производных амфетамина в анализируемых
экстрактах для указанных условий хроматографирования составляет
-8
величину не менее (1,0 - 1,5) х 10 г.
ИК-СПЕКТРОСКОПИЯ
Методика выделения амфетаминов с целью их последующей
идентификации методом ИК-спектроскопии заключается в следующем.
Небольшую часть таблетки (или порошка), примерно 10 - 30 мг,
растворяют в 1 - 2 мл дистиллированной воды. Затем к раствору
после тщательного перемешивания добавляют несколько капель 1 N
раствора гидроксида калия или натрия и 1 мл хлороформа. После
перемешивания и отстаивания смеси осторожно отбирают 0,6 - 0,8 мл
жидкости от нижнего хлороформного слоя и переносят в агатовую
ступку. После испарения растворителя в сушильном шкафу при
температуре 50 град. С в течение 5 - 10 мин к полученному в виде
белых кристаллов или маслянистой пленки веществу добавляют бромид
калия, перетирают полученную смесь и прессуют в виде таблетки
диаметром 2 - 7 мм. Далее спектр регистрируют на любом
-1
дисперсионном или ИК-Фурье спектрометре с разрешением 4 см и
сопоставляют его с базой данных ИК-спектров наркотических средств,
сравнивая спектры по наличию, форме и относительной интенсивности
полос поглощения.
ИК-спектры оснований МДА, МДМА, МДЕА и МВДБ (пробоподготовка -
таблетка с KBr), полученные на спектрометре Paragon 1000РС (фирмы
-1
Perkin-Elmer, США) в диапазоне 4000 - 400 см с разрешением 4
-1
см , приведены на рис. 3, 4, 5, 6.
Следует отметить, что при наличии в исходном объекте двух или
более амфетаминов в хлороформный слой будут экстрагироваться все
амфетамины и их идентификация методом ИК-спектроскопии будет
затруднена. Поэтому в таких случаях необходимо использовать более
сложные способы пробоподготовки - твердофазную экстракцию или
препаративную ТСХ для индивидуального выделения компонентов и
проведения их последующего определения методом ИК-спектроскопии.
Для получения категорического вывода о наличии в исследуемом
объекте МДА, МДМА, МДЕА или МБДБ необходимо использование
каких-либо двух из предлагаемых методов исследования.
Рис. 3. ИК-спектр МДА - основания <*>
Рис. 4. ИК-спектр МДМА - основания <*>
Рис. 5. ИК-спектр МДЕА - основания <*>
Рис. 6. ИК-спектр МБДБ - основания <*>
--------------------------------
<*> Рисунок не приводится.
|
